Dextramer技术助力CAR-T实体瘤移植的临床前评估

作者通过体外实验验证病毒转导是否会影响Treg细胞的表型，作者测定了相关的细胞因子及相关蛋白（IL-2, IL-17A， IL-4和CD4+/CD45RA+/CD25high/CD127low），结果表明TX200-TR101的转导和扩增不会改变Treg的表型。

接着作者利用Dextramer产品和细胞表面蛋白marker共染细胞，通过流式细胞术对HLA-A*02特异性的TX200-TR101 Treg细胞进行分析，发现HLA-A*02特异性的TX200-TR101 Treg细胞表面CD69蛋白上调，CD69是Treg激活后最早上调的细胞表面抗原之一，说明转导之后能引起Treg细胞的激活。

转导HLA-A*02 CAR的T细胞（TX200-TR101 Tregs）体外表征

同时，作者用HLA-A*02 dextramer和 Control dextramer 激活TX200-TR101 Tregs细胞与CD4+/CD25-常规T细胞（Tconv），再将Treg细胞和Tconv以不同比例进行共培养，发现TX200-TR101 Tregs细胞具有抑制Tconv细胞的能力。

该结果表明，利用Immduex HLA-A*02 dextramer和 control dextramer助力作者发现HLA-A*02特异性的TX200-TR101Treg细胞能够发挥免疫抑制功能。

HLA-A*02特异性CAR-Tregs在皮肤移植中的定位

随后，作者采用两种小鼠模型来检测TX200-TR101 Tregs细胞在体内具有降低效应T细胞活性的能力。实验结果表明，TX200-TR101 Tregs细胞具有特异性、免疫抑制功能和安全性。在NOD scid γ (NSG)小鼠中（免疫缺陷的小鼠模型），TX200-TR101细胞不仅能够预防宿主病(GvHD)，还能够定位于HLA-A*02阳性的移植皮肤中。

与他克莫司的相互作用

最后，在这篇文章当中，作者进行了一项为期3个月的人源化HLA-A*02 NSG小鼠模型研究，TX200-TR101持续存在并保持稳定，没有转变为促炎表型。同时使用他克莫司（一种免疫抑制剂）对移植的TX200-TR101 Treg细胞无明显损害。

这些数据表明，TX200-TR101Treg细胞在临床前模型中具有特异性、稳定性、有效性和安全性，为人体相关研究提供了理论基础。